中空纖維細胞培養(yǎng)系統(tǒng)
Spectrum的CELLMAX?人工纖維細胞培養(yǎng)系統(tǒng)與搖瓶、滾瓶等傳統(tǒng)的培養(yǎng)技術如相比,能更好的模仿細胞在體內(nèi)的生長及產(chǎn)物代謝。在CELLMAX?反應器中,細胞圍繞人工中空纖維網(wǎng)三維方向生長,纖維管輸送營養(yǎng)及溶氧帶走代謝副產(chǎn)物和CO2。人工纖維細胞培養(yǎng)能得到更高的細胞密度及蛋白產(chǎn)量,同時保持較高的細胞活性。更小的纖維空間能將分泌產(chǎn)物濃縮,收集容易。系統(tǒng)結(jié)構簡單、分泌產(chǎn)物純凈!
人工纖維反應器的優(yōu)點 代謝產(chǎn)物及抑制因子經(jīng)透析遠離細胞 自分泌及條件因子在細胞周圍累積減少了血清的消耗 培養(yǎng)基的pH是穩(wěn)定的、適應生理需要 巨大的表面積供細胞貼附、溶氧和營養(yǎng)的添加 分泌產(chǎn)物(蛋白&抗體)在小空間(10ml-60ml)ECS中得到濃縮 很容易得到大量的細胞(多達5×1010) 內(nèi)毒素濃度降低 細胞能夠培養(yǎng)長達6個月 系統(tǒng)是封閉的能夠安全的進行病原培養(yǎng)
| 傳統(tǒng)細胞培養(yǎng)設備的缺點 細胞的benefit 長期培養(yǎng)、穩(wěn)定的微環(huán)境及自分泌因子使細胞處在類似組織及器官的內(nèi)環(huán)境中 細胞相互接觸并能保持活力 高細胞濃度(108/ml)發(fā)展的相互作用在細胞混合培養(yǎng)時得到體現(xiàn) 穩(wěn)定的微環(huán)境,細胞在類似體內(nèi)環(huán)境生長
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MWCO:含義及細胞培養(yǎng)的重要性。
膜的截留分子量(MWCO)是用截留百分比間接表示化合物大小的***種方法。MWCO的標準測量單位是道爾頓(Dalton),即***個氫原子的大小。既然MWCO是測量大小的方法,不能將其直接轉(zhuǎn)化為公稱直徑。關于長度尺寸與MWCO對照的圖表、過濾的基本知識請電話告知我們接收您的申請。
營養(yǎng)及廢產(chǎn)物的擴散不會對影響膜的通透性,只有決定在ECS(纖維外空間)中收集產(chǎn)物還是讓其進入培養(yǎng)基中時才需要考慮孔的大小。
為如何選擇***適合您使用的反應器,下面是幾條指導意見:
用于收集分泌產(chǎn)物的貼壁細胞
用再生纖維素或聚砜膜。在ECS(纖維外空間)中接種細胞。較大的比表面積使得在較小空間內(nèi)能培養(yǎng)大量的細胞??讖捷^小,可以在ECS(纖維外空間)中收集濃縮的分泌產(chǎn)物。
用于剪切力研究的貼壁細胞
用聚丙烯涂層或聚乙烯材質(zhì)的反應器進行剪切力實驗。內(nèi)徑較大,可以將細胞接種在纖維內(nèi)表面上,測定培養(yǎng)基流速對貼壁細胞的影響。
用于非分泌產(chǎn)物收集的貼壁細胞
任何***個反應器皆可。如果培養(yǎng)細胞數(shù)量較多,選擇***個表面積較大的反應器。
懸浮細胞
所有的懸浮細胞系都要接種在ECS中。用再生纖維素或聚砜膜。如果不收集產(chǎn)物,可用聚丙烯及聚乙烯膜。
CellMax Duo人工毛細管細胞培養(yǎng)系統(tǒng)
三維細胞培養(yǎng)
CELLMAX? DUO系統(tǒng)的特點是具有兩個泵站且可以培養(yǎng)基瓶,能夠分別容納兩只CellMax? 中空纖維反應器和培養(yǎng)基瓶同時進行兩個獨立的細胞培養(yǎng)。該系統(tǒng)結(jié)構緊湊可放入標準的潮濕溫控CO2培養(yǎng)箱,所有的表面可以用酒精稀釋液擦拭轉(zhuǎn)移到組織培養(yǎng)柜中。
泵通過推壓每只中空纖維反應器上的管路驅(qū)動培養(yǎng)基流出培養(yǎng)基瓶循環(huán)通過反應器,這種方式降低因管壁顆粒的脫落進而阻礙細胞生長的風險。硅膠管具有氣體通透性,可以允許CO2自由擴散,維持培養(yǎng)液pH恒定。CellMax? Duo系統(tǒng)可以調(diào)節(jié)的流量范圍為5-120mL/min。特殊的推動閂設計允許使用者利用單個泵進行低流量培養(yǎng),而另外***個泵可以維持高流量。也可以選用灌注套裝實現(xiàn)纖維外空間(ECS)的流量循環(huán),降低微環(huán)境條件可能對細胞培養(yǎng)產(chǎn)生的傷害。
泵基座通過***條電源線與外部電子控制單元(ECU)連接,ECU背面有磁性可以貼附在培養(yǎng)箱的外殼上。ECU有11個檔位進行流量調(diào)節(jié)。
CellMax Quad系統(tǒng)
同時操控四個培養(yǎng)過程
CELLMAX? Quad人工纖維細胞培養(yǎng)系統(tǒng)是專門為哺乳動物細胞的培養(yǎng)而設計的。
CELLMAX? Quad的特點是位移泵裝置提供壓力保證人工纖維反應器的長期培養(yǎng),精確控制12種流速。調(diào)節(jié)范圍廣的流速對特定剪切力條件下的內(nèi)皮細胞研究非常有用。
該系統(tǒng)可同時操控多達四個分離、獨立的反應器。該系統(tǒng)***大的滿足你的需求,對于無論是同時進行幾種細胞系的培養(yǎng),還是在單個系統(tǒng)里進行單個類型細胞的重復研究,它都是***個理想的選擇。
CellMax? 細胞培養(yǎng)系統(tǒng)的應用:
單克隆抗體生產(chǎn)
當需要在體外生產(chǎn)50毫克至幾克的單克隆抗體時, CELLMAX?人工纖維細胞培養(yǎng)系統(tǒng)是個不錯的選擇。用到的纖維質(zhì)纖維的截留分子量(MWCO)為30kd。抑制因子TGFbeta(轉(zhuǎn)化生長因子β)能自由擴散,較纖維外空間(ECS)中。細胞密度能多于108/ml,抗大分子量的免疫球蛋白類則與雜交瘤細胞***起留在體的濃度范圍為0.5mg-5mg/ml。收集液的體積僅為10-20ml,每個反應器能夠持續(xù)生產(chǎn)抗體長達4-6個月。血清可逐漸減少,逐步適應無血清的培養(yǎng)基。嵌合型非小鼠抗體的生產(chǎn)很容易,減少或消除了生理污染物如類酯、內(nèi)毒素、蛋白及病毒的影響。凈化簡便,總產(chǎn)量得到改善。
內(nèi)皮細胞培養(yǎng)
Spectrum已開發(fā)了幾種人工纖維細胞培養(yǎng)反應器,可用于內(nèi)皮細胞的培養(yǎng)及對其在流動條件下的研究。與其他方法相比,該系統(tǒng)更接近生理環(huán)境,可以進行細胞功能的評估。細胞形態(tài)呈現(xiàn)出與體內(nèi)條件接近的結(jié)果。
CELLMAX? Quad提供了與靜脈或動脈血相接近的剪切力水平。另外,纖維管的微孔特性為平滑肌、腦神經(jīng)膠質(zhì)細胞等血管外周細胞的共培養(yǎng)創(chuàng)造了***個理想的模型。
上圖是剪切力為13-15dynes/cm2的似動脈條件下,在CELLMAX?中培養(yǎng)的內(nèi)皮細胞的掃描電子顯微照片。纖維管縱向剖開后,可以看到中空纖維外壁表面附著***層細胞。經(jīng)人工處理后,單層細胞的***邊已經(jīng)部分脫離了纖維內(nèi)表面,表明了內(nèi)皮細胞層具有的粘附特性。
分泌蛋白生產(chǎn)
目前的生物分泌物如生長因子、重組蛋白及抗體的生產(chǎn)及收集,使用的是效率低下的體外培養(yǎng)系統(tǒng)或動物。CELLMAX?人工纖維細胞培養(yǎng)系統(tǒng)能夠在體積小(10ml-100ml)的纖維外部空間進行高密度(高達5×1010個細胞)的細胞培養(yǎng)。纖維管獨特的分子截留能力能夠?qū)⒎置诋a(chǎn)物截留在小空間中,小分子營養(yǎng)及代謝廢物則可以自由擴散到循環(huán)培養(yǎng)基中。使用CELLMAX?系統(tǒng),無論是產(chǎn)物的總濃度還是單個細胞的分泌量都能增加到原來的10倍或更多??s小的生產(chǎn)空間及低血清或無血清培養(yǎng)基的使用簡化了生產(chǎn)后的凈化。