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幾種常見的PCR儀的區(qū)別及保養(yǎng)

儀器網(wǎng)小編2020-11-17 15:52:02

PCR儀作為分子生物學(xué)相關(guān)實(shí)驗(yàn)的常規(guī)儀器,每年都有數(shù)千臺的選購量,但是如何選擇PCR儀,相信大***在選擇時還有***些困惑。PCR儀作為***種精密儀器,平時應(yīng)該怎么保養(yǎng)?下面給大***講解***下

常見幾種PCR儀分類
普通PCR儀
***般把***次PCR擴(kuò)增只能運(yùn)行***個特定退火溫度的PCR儀,稱之為普通PCR儀。如果要用它做不同的退火溫度則需要多次運(yùn)行。主要是用作簡單的,對目的基因退火溫度的擴(kuò)增。
主要應(yīng)用于科研、教學(xué)、臨床醫(yī)學(xué)、檢驗(yàn)、檢疫等。


梯度PCR儀
***次性PCR擴(kuò)增可以設(shè)置***系列不同的退火溫度條件(通常12種溫度梯度)的稱之為梯度PCR儀。因?yàn)楸粩U(kuò)增的不同的DNApian段其***適合的退火溫度不同,通過設(shè)置***系列的梯度退火溫度進(jìn)行擴(kuò)增,從而***次性PCR擴(kuò)增就可以篩選出表達(dá)量高的***適合退火溫度進(jìn)行有效的擴(kuò)增。主要用于研究未知DNA退火溫度的擴(kuò)增,這樣既節(jié)約時間,也節(jié)約經(jīng)費(fèi)。在不設(shè)置梯度的情況下亦可當(dāng)做普通的PCR用。正真的梯度,是每***排管都有精確的加熱控溫探頭,其他的都是從兩頭的熱傳遞來設(shè)計(jì)控溫。
梯度PCR儀多應(yīng)用于科研、教學(xué)機(jī)構(gòu)。

梯度PCR儀

熒光定量PCR儀
在普通PCR儀設(shè)計(jì)基礎(chǔ)上增加熒光信號激發(fā)和采集系統(tǒng)和計(jì)算機(jī)分析處理系統(tǒng),形成了具有熒光定量PCR功能的儀器。其PCR擴(kuò)增原理和普通PCR擴(kuò)增原理相同,在PCR擴(kuò)增時加入的引物是利用同位素、熒光素等進(jìn)行標(biāo)記,使用引物和熒光探針同時與模板特異性結(jié)合擴(kuò)增。擴(kuò)增的結(jié)果通過熒光信號采集系統(tǒng)實(shí)時采集信號連接輸送到計(jì)算機(jī)分析處理系統(tǒng),得出量化的實(shí)時結(jié)果輸出。
熒光定量PCR儀有單通道,雙通道和多通道之分。當(dāng)只用***種熒光探針標(biāo)記的時候,選用單通道;有多種熒光標(biāo)記的時候使用多通道。單通道也可以檢測多熒光的標(biāo)記和目的基因表達(dá)產(chǎn)物,因?yàn)?**次只能檢測***種目的基因的擴(kuò)增量,需多次擴(kuò)增才能檢測完不同的目的基因片段的量。多通道利于做多重PCR,實(shí)現(xiàn)***次檢測多種目的基因的功能。
實(shí)時熒光定量PCR儀主要應(yīng)用于臨床醫(yī)學(xué)檢測、生物醫(yī)藥研發(fā)、食品行業(yè)、科研院校等。

熒光定量pcr儀

在PCR儀的維護(hù)保養(yǎng)中,需要注意以下問題:

1.PCR儀器需要定期檢測,視制冷方式而定***般半年至少***次。
2.PCR反應(yīng)的要求溫度與實(shí)際分布的反應(yīng)溫度是不***致的,當(dāng)檢測發(fā)現(xiàn)各孔平均溫度差偏離設(shè)置溫度大于1——2℃時,可以運(yùn)用溫度修正法糾正PCR實(shí)際反應(yīng)溫度差。
3.PCR反應(yīng)過程的關(guān)鍵是升、降溫過程的時間控制,要求越短越好,當(dāng)PCR儀的降溫過程超過60s,就應(yīng)該檢查儀器的制冷系統(tǒng),對風(fēng)冷制冷的PCR儀要較徹底地清理反應(yīng)底座的灰塵;對其他制冷系統(tǒng)應(yīng)檢查相關(guān)的制冷部件。
4.***般情況如能采用溫度修正法糾正儀器的溫度時,不要輕易打開或調(diào)整儀器的電子控制部件,必要時要請專業(yè)人員修理或利用儀器電子線路詳細(xì)圖紙進(jìn)行維修。


(來源: 儀器網(wǎng)小編)