一起認識下實驗室耗材配件大家族的重要成員——“色譜柱”
色譜柱由柱管、壓帽、卡套(密封環(huán))、篩板(濾片)、接頭、螺絲等組成。色譜柱可分為填充柱和開管柱兩大類。多為金屬或玻璃制作。有直管形、盤管形、U形管等形狀。液相色譜通常均采用填充柱。而色譜柱的分離效果取決于所選擇的固定相,以及色譜柱的制備和操作條件。
那么我們在使用色譜柱的過程中要注意什么呢?如果色譜柱的儲存液無特殊說明,均為評價報告所示的流動相。在使用前,***定要注意色譜柱的儲存液與要分析樣品的流動相是否互溶。在反相色譜中,如用高濃度的鹽或緩沖液作洗脫劑,應先用10%左右的低濃度的有機相洗脫劑過渡***下,否則緩沖液中的鹽在高濃度的有機相中很容易析出,堵塞色譜柱。
在色譜柱的使用中,往往會出現(xiàn)***些問題,例如柱壓的突然升高,(系統(tǒng)管路堵塞及壓力傳感器故障除外),這種情況可能是由以下幾點原因造成的:(1)色譜柱頭的過濾篩板堵塞或污染; (2)色譜柱頭的填料被樣品污染; (3)色譜柱內(nèi)緩沖液中的鹽遇到高濃度的甲醇或其他有機溶劑,形成結(jié)晶析出; (4)流動相PH值過大或過小使固定相結(jié)構(gòu)破壞或溶解。那怎么解決呢?(1)如果確定是色譜柱頭的過濾篩板被污染,可以將色譜柱反方向用甲醇沖洗至正常壓力,或者卸下色譜柱頭,將其放在10%的稀硝酸內(nèi)超聲清洗10分鐘,后再用純水超聲10分鐘,重新裝入色譜柱。(2)如果確定色譜柱頭的填料被污染,將柱頭螺絲卸下,挖出柱內(nèi)前段被污染的填料,用相同的柱填料重新填入,仔細修復后,重新安裝上柱頭螺絲。 (3)如果確定定是鹽結(jié)晶,用10%的甲醇/水沖洗色譜柱使柱內(nèi)鹽全部溶解,再換高濃度甲醇。(4)如果是因PH值使用不當,則很難恢復。
色譜柱對實驗研究的成功可謂功不可沒,所以我們也要善于保養(yǎng)色譜柱。如果色譜柱想要長時間保存,必須存于合適的溶劑下。對于反相柱可以儲存于純甲醇或乙腈中,正相柱可以儲存于嚴格脫水后的純正己烷中,離子交換柱可以儲存于水(含防腐劑疊氮化鈉或柳硫汞)中,并將購買新色譜柱時附送的堵頭堵上。而且儲存的溫度***好是室溫。
以上內(nèi)容了解過后,相信你對色譜柱已經(jīng)有了更加清晰的認知了。