什么是酶標(biāo)儀?使用時有哪些要點需要注意?
酶標(biāo)儀可能多數(shù)人對它并不是很熟悉,酶標(biāo)儀(MicroplateReader)即酶聯(lián)免疫檢測儀,是應(yīng)用酶標(biāo)法原理,對酶聯(lián)免疫檢測(EIA)實驗結(jié)果進(jìn)行讀取和分析的專業(yè)儀器。酶聯(lián)免疫反應(yīng)通過偶聯(lián)在抗原或抗體上的酶催化顯色底物進(jìn)行的,反應(yīng)結(jié)果以顏色顯示,通過顯色的深淺即吸光度值的大小就可以判斷標(biāo)本中待測抗體或抗原的濃度。酶標(biāo)儀的工作原理核心是用比色法來進(jìn)行分析。測定***般要求測試液的***終體積在250μL以下,用***般光電比色計無法完成測試,因此對酶標(biāo)儀中的光電比色計有特殊要求。
酶標(biāo)儀廣泛地應(yīng)用于臨床檢驗、生物學(xué)研究、農(nóng)業(yè)科學(xué)、食品和環(huán)境科學(xué)中,特別在近幾年中,由于大量的酶聯(lián)免疫檢測試劑盒的應(yīng)用,使得酶標(biāo)儀在生殖保健領(lǐng)域中應(yīng)用越來越廣泛,同時促進(jìn)了生殖健康技術(shù)水平提高。目前***內(nèi)許多計生站系統(tǒng)開展了酶免檢測項目,如:乙肝五項、愛滋病檢測、優(yōu)生優(yōu)育系列檢測、激素檢測等。過去多數(shù)采用目測方法,報出的結(jié)果缺乏科學(xué)的依據(jù)。***內(nèi)多***權(quán)威機(jī)構(gòu),如衛(wèi)生部臨床檢驗中心和計劃生育系統(tǒng)等多次強(qiáng)調(diào)酶標(biāo)儀的重要性,并要求酶聯(lián)免疫檢測試劑應(yīng)使用酶標(biāo)儀判讀,酶免試劑的質(zhì)控也應(yīng)使用酶標(biāo)儀,并提供酶標(biāo)儀測定的原始數(shù)據(jù),而各廠***的試劑盒說明書沒有是讓用目測的。同時酶免檢測的項目往往是***些實質(zhì)性的感染和病變(如:肝炎、愛滋病、優(yōu)生優(yōu)育等),判讀更要求嚴(yán)謹(jǐn),由誤診引起的糾紛很難處理。另外,住院手術(shù)病人術(shù)前的丙肝、愛滋等EIA試劑檢測是避免因輸血引起感染引發(fā)的醫(yī)療事故糾紛的必要手段,正逐漸被許多單位所采用。
從結(jié)構(gòu)上來說,酶標(biāo)儀有單通道和多通道兩種類型,單通道又分為自動型和手動型兩種。其中,自動型的儀器設(shè)有X和Y兩個方向的驅(qū)動機(jī)構(gòu),在機(jī)械裝置的驅(qū)動下,微孔板上的小孔***個個依次進(jìn)入光束下面測試。手動型則靠手移動微孔板來進(jìn)行測量。在單通道酶標(biāo)儀的基礎(chǔ)上,又發(fā)展了多通道、全自動型酶標(biāo)儀。多通道酶標(biāo)儀***般都是自動型的,它設(shè)有多個光束和多個光電檢測器。如8通道的儀器,設(shè)有8條光束(或8個光源)、8個檢測器和8個放大器。在機(jī)械驅(qū)動裝置的作用下,樣品被8個***排、8個***排檢測。多通道酶標(biāo)儀的檢測速度快,但其結(jié)構(gòu)比較復(fù)雜,價格也較貴,多用于大中型醫(yī)院。酶標(biāo)儀的其他部分的結(jié)構(gòu),與光電比色計和小型生化分析儀基本相同。
酶標(biāo)儀在使用時需要注意外部的工作環(huán)境,該儀器是***種精密的光學(xué)儀器,因此良好的工作環(huán)境不僅能確保其準(zhǔn)確性和穩(wěn)定性,還能夠延長其使用壽命:
1、儀器應(yīng)放置在無磁場和干擾電壓的位置;
2、儀器應(yīng)放置在低于40分貝的環(huán)境下;
3、為延緩光學(xué)部件的老化,應(yīng)避免陽光直射;
4、操作時環(huán)境溫度應(yīng)在15℃-40℃之間,環(huán)境濕度在15%-85%之間;
5、操作電壓應(yīng)保持穩(wěn)定;
6、操作環(huán)境空氣清潔,避免水汽,煙塵;
7、保持干燥、干凈、水平的工作臺面,以及足夠的操作空間。
同時,即使有了合適的工作環(huán)境,也需要注意儀器的操作規(guī)范,酶標(biāo)儀的功能是用來讀取酶聯(lián)免疫試劑盒的反應(yīng)結(jié)果,因此要得到準(zhǔn)確結(jié)果,試劑盒的使用必須規(guī)范。在酶標(biāo)儀的操作中應(yīng)注意以下事項:
1、使用加液器加液,加液頭不能混用;
2、洗板要洗干凈。如果條件允許,使用洗板機(jī)洗板,避免交叉污染;
3、嚴(yán)格按照試劑盒的說明書操作,反應(yīng)時間準(zhǔn)確;
4、在測量過程中,請勿碰酶標(biāo)板,以防酶標(biāo)板傳送時擠傷操作人員的手;
5、請勿將樣品或試劑灑到儀器表面或內(nèi)部,操作完成后請洗手;
6、如果使用的樣品或試劑具有污染性、毒性和生物學(xué)危害,請嚴(yán)格按照試劑盒的操作說明,以防對操作人員造成損害;
7、如果儀器接觸過污染性或傳染性物品,請進(jìn)行清洗和消毒;
8、不要在測量過程中關(guān)閉電源;
9、對于因試劑盒問題造成的測量結(jié)果的偏差,應(yīng)根據(jù)實際情況及時修改參數(shù),以達(dá)到***佳效果;
10、使用后蓋好防塵罩。