淺談氨基酸分析儀分析原理
氨基酸分析儀是***種測(cè)定蛋白質(zhì)、肽及其他藥物制劑的氨基酸組成含量的儀器。在眾多行業(yè)當(dāng)中均有應(yīng)用。儀器基本結(jié)構(gòu)同普通HPLC相似,但針對(duì)氨基酸分析進(jìn)行了細(xì)節(jié)優(yōu)化。接下來(lái)我們就來(lái)說(shuō)說(shuō)氨基酸分析儀它的分析原理。
各種蛋白質(zhì)都是由20種氨基酸***尾相連,并以***定的順序組成肽鏈。用水解的方法將肽鏈打開,形成單***的氨基酸進(jìn)行分析。所有的氨基酸在低ph值的條件下都有正電荷,在陽(yáng)離子交換樹脂上均勻被吸附,但吸附的程度不同,堿性氨基酸結(jié)合力***強(qiáng)、其次是芳香族氨基酸、中性氨基酸、酸性氨基酸結(jié)合力***弱。按照氨基酸分析儀設(shè)定的洗脫程序,用不同離子強(qiáng)度、ph值的緩沖液依次將氨基酸按吸附力的不同洗脫下來(lái)(先是酸性氨基酸再是中性氨基酸***后是堿性氨基酸
),被洗脫下來(lái)的氨基酸與茚三酮反應(yīng)液在加熱的條件下反應(yīng)(135度),生成可以在分光光度計(jì)中570mm和440mm檢測(cè)到的藍(lán)紫色物質(zhì)(仲氨生成淺黃色物質(zhì)440mm檢測(cè)),外標(biāo)法定量。
上述文章內(nèi)容就是氨基酸分析儀的基本分析原理,希望能夠幫助大***對(duì)該儀器有更深入的了解。