【液體吸光度測(cè)量】典型配置、硬件說明、軟件操作
從紫外到近紅外再到更長(zhǎng)的波長(zhǎng),吸光度測(cè)量提供了有關(guān)物質(zhì)在所有狀態(tài)下的化學(xué)成分的有價(jià)值的信息。
吸光度測(cè)量?jī)?yōu)勢(shì): 無損測(cè)量-除非你的樣品是光敏的,否則測(cè)量可以在不改變樣品的情況下重復(fù)進(jìn)行。 定量結(jié)果-用吸光度測(cè)定溶液濃度。 準(zhǔn)確性和重復(fù)性-使用適當(dāng)?shù)墓ぞ吆头椒ǎ舛瓤梢员涣炕?,具有很高的測(cè)量到測(cè)量的精度。 【HL -2000 光源介紹】 光源的基本操作步驟: 啟動(dòng)光源,預(yù)熱 10 分鐘,以達(dá)到穩(wěn)定狀態(tài); 光纖與光源連接后,可通過轉(zhuǎn)動(dòng)調(diào)節(jié)光闌旋鈕控制光強(qiáng); 如果用戶在實(shí)驗(yàn)操作中對(duì)光源的輸出光譜有特殊要求,可在插片凹槽處放置濾光片、衰減片等光學(xué)器件。 圖2 HL-2000-FHSA 光源實(shí)物圖 圖 3 ***次性比色皿 圖4 石英比色皿 圖 5 CUV-UV 比色皿支架 圖 6 CUV-UV-10 比色皿支架 此外,海洋光學(xué)還提供 CUV-VAR 型可變光程的比色皿架,可調(diào)節(jié)光程范圍為 1-10cm, 內(nèi)置的準(zhǔn)直鏡固定在支架上,支架可在基座上滑動(dòng),CUV-VAR 適用于需改變光程的液體的吸光度測(cè)量。 圖7 CUV-ALL-UV 4-WAY 比色皿支架 圖8 CUV-FL-DA 直連比色皿支架 圖9 CUV-VAR 可變光程比色皿架 圖10 CUV-QPOD 可控溫比色皿支架 圖11 CUV-ALL-UV 4-WAY 比色皿支架實(shí)物圖 圖12 連接附件 02 硬件說明 搭建液體吸光度測(cè)量系統(tǒng),具體操作步驟如下: 1)使用***根光纖連接比色皿支架與光譜儀,另***根光纖連接比色皿支架與光源,注意兩端光纖呈 180°(如圖14 所示); 2) 通過USB 數(shù)據(jù)線連接光譜儀至PC 端; 3)用電源線連接光源和市電插座(注意選擇帶地線的***標(biāo)電源線和市電插座); 4) 打開光源,預(yù)熱***段時(shí)間后,在空比色皿中裝入純水,測(cè)量參考光譜; 5)切斷光路(此處不建議直接關(guān)閉光源,可通過遮擋光源來切斷光路),測(cè)量背景光譜; 6)恢復(fù)光路,將樣品裝入空比色皿,進(jìn)行樣品的吸光度測(cè)量。 圖13 裝有樣品的比色皿 圖 14 CUV-ALL-UV 4-WAY 比色皿支架 圖15 遮光罩 圖 16 液體吸光度測(cè)量系統(tǒng)實(shí)物圖 圖17 Flame 光譜儀接口說明 注意:吸光度測(cè)量時(shí),遮光罩應(yīng)始終放置在樣品上方,排除環(huán)境光的干擾。 03 軟件操作 本部分介紹吸光度測(cè)量的軟件操作流程,具體操作步驟如下: 1)從歡迎界面或者點(diǎn)擊圖標(biāo) 2)出現(xiàn)“選擇濃度模型”窗口,點(diǎn)擊“僅吸光度”選項(xiàng),其他兩項(xiàng)見文檔***后的補(bǔ)充介紹。 僅吸光度:測(cè)量液體或氣體樣品的吸光度。 朗伯比爾定律:適用于測(cè)量未知濃度的樣品,在吸光度測(cè)量的基礎(chǔ)上,輸入樣品的消光系數(shù)和光程,利用朗伯比爾定律 ???? = ????cl,得到樣品的濃度。 3)調(diào)整好硬件配置后,在軟件中設(shè)置數(shù)據(jù)采集參數(shù),包括積分時(shí)間(integration time)、平均次數(shù)(average)和滑動(dòng)平均(boxcar)。用戶可根據(jù)光源的強(qiáng)度,調(diào)節(jié)積分時(shí)間和平均次數(shù)等參數(shù),勾選 “暗噪聲校準(zhǔn)”和“非線性校準(zhǔn)”功能。注意參考 譜測(cè)量和樣品測(cè)量時(shí)的參數(shù)設(shè)置應(yīng)相同。設(shè)置完成,光譜將顯示在右側(cè)譜圖界 面,點(diǎn)擊“下***步”按鈕。 積分時(shí)間:積分時(shí)間是檢測(cè)器在將累積的電荷通過A/D轉(zhuǎn)換器加工之前,被允許收集光子的時(shí)間長(zhǎng)度。***小積分時(shí)間是設(shè)備支持的***短積分時(shí)間,它取決于檢測(cè)器讀出所有像素信息的快慢,積分時(shí)間 與數(shù)據(jù)傳輸速度是不同的概念。 平均次數(shù):光譜被顯示到軟件里之前會(huì)采集多次,然后取平均。 滑動(dòng)平均:平滑是***種可以應(yīng)用于光譜的空間平均。該過程通過平均相鄰像素點(diǎn)的值來消除噪聲,因此它會(huì)以犧牲光學(xué)分辨率為代價(jià)來提高信噪比??臻g平均在光譜相對(duì)平坦以及相近像元變化較小的情 況下使用是非常有效的,但由此產(chǎn)生是分辨率的損失會(huì)使得尖銳的光譜特征峰難以分辨。當(dāng)應(yīng)用空間 平均時(shí),信噪比會(huì)以像元平均的平方根為基數(shù)進(jìn)行提高。請(qǐng)注意,在海洋光學(xué)軟件中,平滑寬度的值 是指所有像元以中間為基準(zhǔn)靠左或靠右的像元和的平均數(shù)。平滑值是4實(shí)際上是將9個(gè)像元***起平均(4個(gè)靠左像元+1個(gè)中心像元+4個(gè)靠右像元),信噪比將以3為倍數(shù)增加。同樣的,平滑值是2(5個(gè) 像元)將使信噪比以2.2為倍數(shù)增加,平滑值是0(1個(gè)像元),信噪比以1為倍數(shù)增加(因此光譜不改 變)。 暗噪聲校準(zhǔn):海洋光學(xué)的大部分光譜儀都有自帶的遮光像元。暗噪聲校準(zhǔn)會(huì)用當(dāng)前光譜讀數(shù)減去遮光 像元的讀書,以排除溫飄等系統(tǒng)性影響。 非線性校準(zhǔn):光譜儀出廠前已完成。如無特殊需求,請(qǐng)默認(rèn)勾選。 觸發(fā)模式:請(qǐng)參考海洋網(wǎng)站的相關(guān)文檔。如無特殊需求,可保持默認(rèn)設(shè)置不變。 4)出現(xiàn)“保存參考光譜”窗口,點(diǎn)擊圖標(biāo) 5)出現(xiàn)“保存背景光譜”窗口,點(diǎn)擊圖標(biāo) 6)在視圖窗口中,吸光度測(cè)量結(jié)果以兩張圖譜的形式顯示。如下圖所示,左側(cè)為吸光度圖譜,右側(cè)為光譜全譜,圖譜結(jié)果均實(shí)時(shí)更新。點(diǎn)擊 創(chuàng)建新的光譜應(yīng)用,在光譜應(yīng)用向?qū)е悬c(diǎn)擊吸光度向?qū)D標(biāo)
。
保存參考光譜,再點(diǎn)擊“下***步”。
按鈕,保存背景光譜。之后點(diǎn)擊“完成”按鈕完成設(shè)置。
“以表格形式查看 結(jié)果”,即可查看圖譜的數(shù)據(jù)表,表中的數(shù)據(jù)可復(fù)制后粘貼到Excel 或 txt。
: 單步采集光譜數(shù)據(jù),單次采集后停止,點(diǎn)擊運(yùn)行,可繼續(xù)采集。
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