由沙門菌引起的感染性疾病是***個世界性健康難題，對全球特別是發(fā)展中******構(gòu)成嚴(yán)重威脅，被世界衛(wèi)生組織列為具有嚴(yán)重危害或中等危害的食源性病原菌。

由不同血清型沙門菌引發(fā)的疾病類型會有所差異，沙門菌血清型的準(zhǔn)確快速鑒定對暴發(fā)流行中的溯源分析具有重要意義。

***近看到***篇由王雅靜，管紅霞，沙丹等撰寫的專業(yè)論文《實時熒光PCＲ檢測技術(shù)在沙門菌血清鑒定中的應(yīng)用》，研究對比實時熒光PCＲ法和傳統(tǒng)的玻片凝集法在實驗操作、檢測成本及靈敏度等方面的差異，了解實時熒光PCＲ 檢測技術(shù)在沙門菌血清分型中的實際應(yīng)用價值。

研究方法

研究結(jié)果

144 株沙門菌利用傳統(tǒng)玻片凝集法均可分型，共鑒定出 28 個型別。兩種方法鑒定結(jié)果***致的有 134 株菌，符合率為93. 06%，Kappa 值為 0. 68，具有高度***致性。

采用實時熒光 PCＲ 法鑒定沙門菌血清型，結(jié)果與金標(biāo)準(zhǔn)的玻片凝集法具有高度***致性。有10 株菌株檢測結(jié)果與玻片凝集法不***致，可能與致病菌自身部分待測基因環(huán)境或宿主的改變發(fā)生突變，進(jìn)而基因組呈現(xiàn)多樣性有關(guān)。

4 種沙門菌優(yōu)勢血清型兩種方法分型結(jié)果完全***致，且此血清型分布與 2017年無錫市食品行業(yè)從業(yè)人員沙門菌血清分布基本***致。

玻片凝集法VS實時熒光PCＲ法

玻片凝集法直觀且可靠性高，是目前公認(rèn)的沙門菌血清分型金標(biāo)準(zhǔn)。但耗時長，操作過程復(fù)雜，需嘗試的血清診斷試劑較多，鑒定成本高，常要受制于試劑種類與質(zhì)量優(yōu)劣，且需多次誘導(dǎo)時具有***定鑒定難度。

部分粗糙型自凝性沙門菌利用玻片凝集法不能進(jìn)行分型。個別情況下沙門菌的抗原與血清凝集反應(yīng)程度較弱，對實驗人員經(jīng)驗和操作水平要求高。

實時熒光PCR法是基于目標(biāo)基因簇中特定區(qū)域或基因片段，操作簡單，不易出現(xiàn)差錯，對普通實驗人員來說從分離培養(yǎng)、提取核酸到檢測、記錄 Ct 值、確定血清分型***多僅需要 1 d，且常規(guī)的***塊 96 孔 PCＲ 板可以同時檢測 8 份樣本，極大縮短了檢測時間。

但實時熒光 PCＲ 法對***些不常見、存在交叉情況的血清型鑒定時，尚無法準(zhǔn)確判斷沙門菌血清型。

實時熒光 PCＲ 法成本為 100 元/份，操作簡單，耗時僅 1 d; 玻片凝集法成本為 300 元/份，操作復(fù)雜，耗時 3～5 d。