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DESI結(jié)合離子淌度可視化天然產(chǎn)物同分異構(gòu)體空間分布

2024-09-06 09:31:06

本文基于環(huán)形離子淌度和解吸電噴霧電離質(zhì)譜成像系統(tǒng)(Cyclic IMS-DESI), 測(cè)定植物根組織中同分異構(gòu)體的特異性空間分布,通過環(huán)形離子淌度4圈分離得到花椒毒素和佛手柑內(nèi)酯各自空間定位。方法簡(jiǎn)單無需復(fù)雜樣品前處理,使得同分異構(gòu)體原位質(zhì)譜成像成為可能。離子淌度功能的加入為原位質(zhì)譜成像提供了新的分離維度,進(jìn)***步提高質(zhì)譜成像結(jié)果的豐富性和準(zhǔn)確性。


 優(yōu)勢(shì)

  • DESI以其無損、無需衍生、無需基質(zhì)、操作簡(jiǎn)單等特點(diǎn)成為目前質(zhì)譜成像領(lǐng)域非常重要的研究工具;

  • Cyclic環(huán)形離子淌度可提供高達(dá)750的淌度分辨率,且可根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求調(diào)整淌度分辨率;

  • 質(zhì)譜成像和離子淌度技術(shù)的完美融合,實(shí)現(xiàn)了同分異構(gòu)體原位質(zhì)譜成像;

  • 專屬TriWave功能模塊,充分發(fā)揮四極桿、碎裂池、離子淌度分離等各功能單元作用,為化合物結(jié)構(gòu)深度解析奠定基礎(chǔ)。

圖1. 目標(biāo)同分異構(gòu)體



實(shí)驗(yàn)結(jié)果

01
離子淌度分離目標(biāo)同分異構(gòu)體

圖2. 花椒毒素和佛手苷內(nèi)酯混合標(biāo)準(zhǔn)品溶液在Cyclic中不同淌度分離圈數(shù)對(duì)應(yīng)淌度分離譜圖;A) 淌度分離單圈混合標(biāo)準(zhǔn)品淌度分離圖;B) 淌度分離2圈混合標(biāo)準(zhǔn)品淌度分離圖;C) 淌度分離4圈混合標(biāo)準(zhǔn)品淌度分離圖。
02
根組織樣品中花椒毒素和佛手苷內(nèi)酯空間分布

采用標(biāo)準(zhǔn)品優(yōu)化的離子淌度分離參數(shù)對(duì)實(shí)際植物根組織樣品進(jìn)行DESI-IM-MS分析,對(duì)比實(shí)際樣品淌度分離單圈和4圈效果。結(jié)果顯示:

  • 單圈淌度分離下可以獲得花椒毒素和佛手苷內(nèi)酯對(duì)應(yīng)母離子質(zhì)荷比的成像圖,但通過淌度分離譜圖可知此時(shí)成像圖為二者混合疊加結(jié)果(圖3.A);

  • 4圈淌度分離后獲得花椒毒素和佛手苷內(nèi)酯相同質(zhì)荷比下兩張成像圖,對(duì)應(yīng)淌度分離圖上漂移時(shí)間(Drift Time, DT)分別為43.69 ms和45.34 ms(圖3.B)。

借助Cyclic環(huán)形離子淌度多圈分離實(shí)現(xiàn)了原位電離分析下DESI質(zhì)譜成像的同分異構(gòu)體空間分布表征。

圖3. DESI分析植物根組織樣品在Cyclic中不同淌度分離圈數(shù)對(duì)應(yīng)淌度分離譜圖;A) 淌度分離單圈樣品淌度分離圖及成像圖;B) 淌度分離4圈樣品淌度分離圖及成像圖。
03
離子淌度輔助定性和結(jié)構(gòu)解析

離子淌度質(zhì)譜儀專屬TriWave功能模塊,充分發(fā)揮四極桿、碎裂池、離子淌度分離等各功能單元作用,為化合物結(jié)構(gòu)深度解析奠定基礎(chǔ)。本次實(shí)驗(yàn)中***先通過離子淌度對(duì)目標(biāo)同分異構(gòu)體進(jìn)行分離,并將樣品中目標(biāo)物淌度行為和標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)行比對(duì)分別獲得花椒毒素和佛手柑內(nèi)酯空間分布。此外實(shí)驗(yàn)中還將經(jīng)過淌度分離后的目標(biāo)物進(jìn)行碎裂,獲得各自二***碎片圖譜(圖4.B和D),對(duì)碎片進(jìn)行分析,將獲得的同分異構(gòu)體二***碎片與開源數(shù)據(jù)庫(kù)MassBank中標(biāo)準(zhǔn)品二***譜圖(圖4.A和C)比對(duì)具有高度***致性,說明可以利用此功能在沒有標(biāo)準(zhǔn)品情況下定性異構(gòu)體。結(jié)果發(fā)現(xiàn)佛手柑內(nèi)酯的主要碎片m/z 174,m/z 202,花椒毒素的主要碎片m/z 161,m/z 174,m/z 202。由于佛手柑內(nèi)酯沒有特定碎片使之與花椒毒素進(jìn)行區(qū)分,因此如果沒有離子淌度功能的補(bǔ)充,無法利用碎片差異獲得此對(duì)同分異構(gòu)體各自空間分布。提示通過Cyclic IMS-DESI可以實(shí)現(xiàn):1)質(zhì)譜成像原位區(qū)分同分異構(gòu)體;2)淌度分離后的碎裂功能輔助定性和結(jié)構(gòu)解析。

圖4. DESI-Cyclic環(huán)形離子淌度4圈淌度分離條件下實(shí)際樣品中花椒毒素和佛手苷內(nèi)酯淌度分離譜圖及對(duì)應(yīng)二***碎片譜圖;A) MassBank庫(kù)中佛手柑內(nèi)酯二***譜圖;B) 樣品中DT43.69 ms峰二***譜圖;C) MassBank庫(kù)中花椒毒素二***譜圖;D) 樣品中DT45.34 ms峰二***譜圖。
04
去除背景干擾

DESI質(zhì)譜成像以其原位電離優(yōu)勢(shì)為大眾熟知,與此同時(shí)也帶來原位分析下不可避免的基質(zhì)干擾問題,此時(shí)離子淌度技術(shù)的出現(xiàn)恰恰可以作為彌補(bǔ),帶來原位分析下的高質(zhì)量質(zhì)譜分析結(jié)果。本次實(shí)驗(yàn)通過樣品單圈淌度分離已經(jīng)可以非常好的體現(xiàn)離子淌度帶給原位分析的優(yōu)勢(shì)。單圈淌度分離條件下,花椒毒素和佛手柑內(nèi)酯混合標(biāo)準(zhǔn)品和樣品中目標(biāo)物均沒有得到有效分離,但明顯觀察到樣品背景中目標(biāo)物存在干擾(圖5.A)。此時(shí)通過淌度可以將背景干擾與目標(biāo)峰分離,獲得樣品中特定組分空間分布信息,凸顯了實(shí)際樣品分析中離子淌度分離技術(shù)對(duì)原位質(zhì)譜成像的關(guān)鍵性補(bǔ)充作用,使得實(shí)驗(yàn)結(jié)果更真實(shí)、準(zhǔn)確。

圖5. DESI-Cyclic環(huán)形離子淌度單圈淌度分離條件下實(shí)際樣品和混合標(biāo)準(zhǔn)品中花椒毒素和佛手苷內(nèi)酯分離譜圖;A) 實(shí)際樣品中目標(biāo)離子淌度分離圖;B) 混合標(biāo)準(zhǔn)品中目標(biāo)離子淌度分離圖。



結(jié)論

  • DESI XS與Cyclic環(huán)形離子淌度質(zhì)譜聯(lián)用可以顯著提高峰容量。

  • 質(zhì)譜成像原位分析中,離子淌度的加入可以有效去除背景干擾。

  • 原位成像水平對(duì)同分異構(gòu)體進(jìn)行空間分布上的有效區(qū)分。

  • 專屬TriWave功能模塊,實(shí)現(xiàn)對(duì)特定離子淌度分離后碎裂,輔助結(jié)構(gòu)解析。 


(文章來源于儀器網(wǎng))

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