血凝儀工作原理
血凝儀全稱血液凝固分析儀,分為半自動(dòng)和全自動(dòng)兩類。血凝儀主要是對(duì)血栓和止血進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室檢查的儀器,利用血凝儀進(jìn)行血栓與止血的實(shí)驗(yàn)室檢查,可為出血性和血栓性疾病的診斷、溶栓以及抗凝治療的監(jiān)測(cè)及療效觀察提供了有價(jià)值的指標(biāo)。
血凝儀工作原理:
目前可開展的血栓/止血成份檢測(cè)方法主要有凝固法、底物顯色法、免疫法、乳膠凝集法等。在表中可注意到,在血栓/止血檢驗(yàn)中***常用的凝血酶原時(shí)間(PT)、活化部分凝血活酶時(shí)間(APTT)、纖維蛋白原(FIB)、凝血酶時(shí)間(TT)、內(nèi)源凝血因子、外源凝血因子、高分子量肝素、低分子量肝素、蛋白C、蛋白S等均可用凝固法測(cè)量。所以目前半自動(dòng)血凝儀基本上都是以凝固法測(cè)量為主,而在全自動(dòng)血凝儀中也***定有凝固法測(cè)量。
凝固法中又可分為光學(xué)法和磁珠法兩類。由于光學(xué)法幾乎可涵蓋各種檢測(cè)方法,為了降低儀器制造成本,全自動(dòng)血凝儀以光學(xué)法居多。但也有少數(shù)高***全自動(dòng)血凝儀中凝固法測(cè)量采用無樣品干擾的雙磁路磁珠法,而其它測(cè)量采用光學(xué)法,并可同時(shí)進(jìn)行檢測(cè)。
光學(xué)法(比濁法)
光學(xué)法血凝儀是根據(jù)血漿凝固過程中濁度的變化來測(cè)定凝血功能。根據(jù)儀器不同的光學(xué)測(cè)量原理,又可分為散射比濁法和透射比濁法兩類。
(1)散射比濁法是根據(jù)待驗(yàn)樣品在凝固過程中散射光的變化來確定檢測(cè)終點(diǎn)的。在該方法中檢測(cè)通道的單色光源與光探測(cè)器呈90O直角,當(dāng)向樣品中加入凝血激活劑后,隨樣品中纖維蛋白凝塊的形成過程,樣品的散射光強(qiáng)度逐步增加。當(dāng)樣品完全凝固以后,散射光的強(qiáng)度不再變化,通常是把凝固的起始點(diǎn)作為0%,凝固終點(diǎn)作為***,把50%作為凝固時(shí)間。光探測(cè)器接收這***光學(xué)的變化,將其轉(zhuǎn)化為電信號(hào),經(jīng)過放大再被傳送到監(jiān)測(cè)器上進(jìn)行處理,描出凝固曲線。
(2)透射比濁法,是根據(jù)待測(cè)樣品在凝固過程中吸光度變化來確定凝固終點(diǎn)的、與散射比濁法不同的是該方法的光路同***般的比色法***樣呈直線安排:來自光源的光線經(jīng)過處理后變成平行光,透過待測(cè)樣品后照射到光電管變成電信號(hào),經(jīng)過放大后監(jiān)測(cè)處理。當(dāng)向樣品中加入凝血激活劑后,開始的吸光度非常弱,隨著反應(yīng)管中纖維蛋白凝塊的形成,標(biāo)本吸光度也逐漸增強(qiáng),當(dāng)凝塊完全形成后,吸光度趨于恒定。血凝儀可以自動(dòng)描繪吸光度的變化曲線并設(shè)定其中某***點(diǎn)對(duì)應(yīng)的時(shí)間為凝固時(shí)間。
磁珠法
磁珠法是根據(jù)血漿凝固過程中粘度的變化來測(cè)量凝血功能的。根據(jù)儀器對(duì)磁珠運(yùn)動(dòng)測(cè)量原理的不同,又可分為光電探測(cè)法和電磁珠探測(cè)法。
(1)光電探測(cè)法,在磁珠法中光電探測(cè)器的作用與光學(xué)法中不同,它只測(cè)量血漿凝固過程中磁珠的運(yùn)動(dòng)規(guī)律,與血漿的濁度無關(guān)。在磁珠法中的***對(duì)電磁鐵安放在測(cè)試杯的兩端,它們產(chǎn)生恒定的交替磁場(chǎng)使磁珠在測(cè)試杯中擺動(dòng),在與磁珠擺動(dòng)的垂直方向安放***對(duì)光電接收裝置,當(dāng)磁珠擺幅衰減到50%時(shí)確定凝固終點(diǎn)。
光電探測(cè)法中還有***種利用紅外光反射監(jiān)測(cè)器監(jiān)測(cè)磁珠運(yùn)動(dòng)的,下面介紹BE系列半自動(dòng)血凝儀中將另加介紹。
(2)電磁探測(cè)法又可稱為雙磁路磁珠法,其中***對(duì)磁路用于吸引磁珠擺動(dòng),另***對(duì)磁路利用磁珠擺動(dòng)過程中對(duì)磁力線的切割所產(chǎn)生的電信號(hào),對(duì)磁珠擺動(dòng)幅讀度進(jìn)行監(jiān)控,當(dāng)磁珠擺動(dòng)幅度衰減到50%確定凝固終點(diǎn)。
相比較來說,光學(xué)法和磁珠法用于血凝檢測(cè),就方法論而言各有千秋。
光學(xué)法的優(yōu)點(diǎn)在于結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單、靈敏度高。易于自動(dòng)化等。缺點(diǎn)在于易受特異血漿干擾,對(duì)此各廠***已采取不同措施予以彌補(bǔ)。
磁路法優(yōu)點(diǎn)不受特異血漿的干擾,試劑量少,缺點(diǎn),磁珠的質(zhì)量、杯壁的光滑程度等,均會(huì)對(duì)測(cè)量結(jié)果造成影響。