凝膠成像儀使用步驟及注意事項(xiàng)
凝膠成像儀廣泛應(yīng)用于分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中,尤其是在DNA、RNA或蛋白質(zhì)電泳分析后,用于檢測和記錄凝膠中的條帶。使用凝膠成像儀時(shí)需要遵循***定的步驟和注意事項(xiàng),以確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性和儀器的長期穩(wěn)定性。下面是凝膠成像儀的使用步驟及相關(guān)注意事項(xiàng):
凝膠成像儀使用步驟
1.準(zhǔn)備工作
準(zhǔn)備凝膠:根據(jù)實(shí)驗(yàn)要求,先做好凝膠電泳實(shí)驗(yàn)(如瓊脂糖凝膠電泳),確保凝膠已經(jīng)正確浸泡在適當(dāng)?shù)碾娪揪彌_液中,條帶已經(jīng)分離清晰。
準(zhǔn)備樣品:如果是DNA或RNA分析,確保樣品中已添加適量的染料(如EB染料或SYBRGreen),以便在成像時(shí)能清晰可見。對于蛋白質(zhì)電泳實(shí)驗(yàn),通常使用CoomassieBrilliantBlue、銀染或其他蛋白染色方法。
2.啟動(dòng)成像儀
打開設(shè)備:按下凝膠成像儀的電源開關(guān),啟動(dòng)系統(tǒng)。
調(diào)整參數(shù):根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要,設(shè)置合適的曝光時(shí)間、成像模式(如UV、白光、熒光模式等),以及相機(jī)的其他參數(shù)(如增益、對比度等)。
3.放置凝膠
放置凝膠:將電泳后的凝膠小心地放置在成像儀的臺(tái)面上,確保凝膠的正面朝向儀器的成像系統(tǒng)。
調(diào)整位置:使用設(shè)備的對位工具或觀察屏,確保凝膠位于成像儀的成像區(qū)域內(nèi)。
4.選擇成像模式和曝光
選擇適當(dāng)?shù)臑V光片:根據(jù)使用的染料或熒光標(biāo)記物選擇合適的濾光片。如果使用熒光染料,確保選擇匹配該染料激發(fā)和發(fā)射波長的濾光片。
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