非接觸細(xì)胞破碎儀操作指南
***、LZ-1500P非接觸細(xì)胞破碎儀準(zhǔn)備與安裝
1.環(huán)境適配:儀器需放置于干燥、無腐蝕性氣體的實(shí)驗(yàn)室臺(tái)面,避免陽(yáng)光直射。配套低溫冷卻液循環(huán)機(jī)需提前開啟,設(shè)定目標(biāo)溫度,確保溶劑槽內(nèi)冷卻液循環(huán)流量達(dá)12L/min,防止超聲產(chǎn)熱導(dǎo)致樣本變性。
2.樣品裝載:根據(jù)樣本量選擇適配支架(如1.5ml*9孔、15ml*5孔、50ml*3孔),將離心管或PCR管固定于旋轉(zhuǎn)支架中。需注意,管徑需與支架孔徑匹配,避免超聲時(shí)晃動(dòng)。例如,處理二代測(cè)序DNA片段化樣本時(shí),1.5ml離心管需緊密嵌入支架,防止能量分布不均。
3.溶劑槽注液:向溶劑槽注入蒸餾水至刻度線,確保冷卻盤管全部浸沒。水層厚度需超過盤管5mm,以維持高效熱交換。
二、參數(shù)設(shè)置與運(yùn)行
1.功率與頻率調(diào)節(jié):通過中文液晶面板設(shè)定功率(1-***可調(diào))與頻率(20-40kHz自動(dòng)掃頻)。例如,破碎大腸桿菌細(xì)胞提取膜蛋白時(shí),功率設(shè)為60%(約900W),頻率選擇30kHz,可平衡破碎效率與蛋白活性保留。
2.脈沖模式優(yōu)化:采用周期性脈沖破碎(占空比1-99%可調(diào)),如設(shè)置“超聲2秒/間歇1秒”的脈沖模式,可減少樣本泡沫產(chǎn)生。對(duì)于微量樣本(如5μL貴重試劑),需縮短單次超聲時(shí)間至0.5秒,避免過度曝氣。
3.全程時(shí)間控制:總處理時(shí)間根據(jù)樣本量與破碎難度設(shè)定。例如,32管1.5ml樣本的細(xì)菌破碎,全程時(shí)間設(shè)為10分鐘,配合旋轉(zhuǎn)支架自動(dòng)勻速旋轉(zhuǎn),確保每管樣本受能均勻。
三、實(shí)驗(yàn)優(yōu)化與維護(hù)
1.低溫保護(hù)策略:若處理熱敏感樣本,需啟用低溫冷卻系統(tǒng),將溶劑槽溫度控制在4-10℃。實(shí)驗(yàn)顯示,此條件下病毒感染力保留率較常溫提升40%。
2.交叉污染防控:非接觸式設(shè)計(jì)避免了傳統(tǒng)探頭式設(shè)備的金屬離子污染風(fēng)險(xiǎn)。但需定期清潔溶劑槽與旋轉(zhuǎn)支架,使用75%乙醇擦拭殘留樣本,防止微生物滋生。
3.設(shè)備校準(zhǔn)與保養(yǎng):每月檢查換能器與變幅桿連接緊固度,使用標(biāo)準(zhǔn)砝碼測(cè)試功率輸出精度。若發(fā)現(xiàn)功率衰減超過10%,需聯(lián)系廠商更換核心部件。
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